脂肪酸的生物合成高级脂肪酸的合成，以乙酰辅酶A为基础，通过乙酰辅酶A羧化酶的作用，在腺嘌呤核苷三磷酸的分解的同时与二氧化碳结合，产生丙二酸单酰辅酶A，开始这一阶段是控速步骤，为柠檬酸所促进。丙二酸单酰辅酶A与乙酰辅酶A一起，在脂肪酸合成酶的催化下合成碳十六的软脂酸，但这是包括在酰基载体蛋白参与下的脱羧、二碳单位缩合、以及由NADPH还原过程在内的反复进行的复杂过程。产生的脂肪酸作为辅酶A衍生物，在线粒体中与乙酰辅酶A，在线粒体中与丙二酸单酰辅酶A缩合，每次增加两个碳，不断延长碳链。而单不饱和脂肪酸，由饱和酰基辅酶A的好氧的不饱和化而产生。