限制性核酸内切酶作用特点：

1、识别位点的DNA序列呈二重旋转对称结构；

2、切割DNA均产生磷酸和羟基的末端；

3、错位切割产生具有突出的粘性末端，沿对称轴切割双链DNA产生平头末端；

4、少数不同的限制性核酸内切酶可识别和切割相同的位点。