1、取3mL菌液，8000g离心5min收集菌体；

2、加入200μL溶液I，充分震荡混匀；

3、加入400μL新配制的溶液II缓慢颠倒离心管数次以充分混匀，室温放置5min；

4、加入300μL溶液III，混匀后，冰浴放置10min，期间摇动3次；

5、4˚C 10000g离心10min，取上清；

6、加入0.6乘体积异丙醇，混匀，室温放置15min。10000g离心10min，弃上清，沉淀用百分之七十乙醇洗涤2次，室温干燥；

7、加50μL TE溶解沉淀，负20摄氏度保存质粒。