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求问引物合成的具体实验步骤

更新时间: 2020-09-15 00:00:00

引物合成的具体实验步骤:

1、脱掉附加在CPG担体上的第一个碱基5羟基基团上的保护基,准备附加下一个新的碱基;

2、活化新的碱基单体,准备与第一个碱基进行反应;

3、第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应;

4、将没有反应的第一个碱基的5羟基加帽封死,使其不再进一步参与反应;

5、将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯。

6、重复进行第一步到第五步的循环,直至合成完所需的Oligo DNA序列。

7、合成结束后,将Oligo DNA分子从CPG上切下,再进行进一步的纯化。

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