1、利用基因重组的技术进行基因敲除，根据目的基因序列设计合成出同源基因片段，利用基因打靶技术将携带同源基因片段的基因打靶载体，用电穿孔的技术导入同源的胚胎干细胞中，利用同源基因片段取代靶基因，达到基因敲除的目的。

2、筛选出基因打靶成功的细胞，用选择性培养基筛选出基因打靶成功的细胞。

3、将打靶成功的细胞导入小鼠体内，观察表形。将打靶成功的细胞导入小鼠囊胚中，再将囊胚导入假孕小鼠体内，发育成为基因敲除的小鼠，观察目的基因改变后的小鼠的生物学性状改变，达到验证目的基因功能的目的。