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如何进行pcr引物设计

更新时间: 2020-09-16 00:00:00

原理:

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。

原则:

引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。产物不能形成二级结构。引物长度一般在15到30碱基之间。G加C含量在百分之40到60之间。碱基要随机分布。引物自身不能有连续4个碱基的互补。引物之间不能有连续4个碱基的互补。引物5撇端可以修饰。引物3撇端不可修饰。引物3撇端要避开密码子的第3位。

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