1、培养基配方：

（1）I号：PDA(马铃薯200g+葡萄糖18g+琼脂18g+水1000m1)；

（2）Ⅱ号：PDA+硫酸镁1.5g+磷酸二氢钾3g+蛋白胨2g+水1000ml；

（3）Ⅲ号：马铃薯100g+干杂木屑100g+葡萄糖20g+琼脂20g+水1000ml。

（4）注意：上述配方的培养基经高压20分钟灭菌消毒后制成试管斜面，3天内用完。

2、制作方法：

通过组织分离技术，将选取的大球盖菇组织块接入I号培养基上(或接入需复壮的保存种)。在24--28℃条件下经10--15天培养,菌丝长至试管1/3--1/4时,挑取菌丝扩展前端浓密、粗壮的部分转入Ⅱ号或Ⅲ号培养基上，采用两点接种法，以使菌丝迅速长满培养基表面(一般15--20天)提高菌丝的质量。经Ⅱ号、Ⅲ号复壮培养基培养的菌丝表现为浓白、粗壮、生命力强，以利原种菌丝的生长，缩短原种培养时间，提高成品率。