1、所需要的酶是：切割质粒的限制性内切酶、将二者连接完整的连接酶。

2、通过基因工程手段，用特定的限制性内切酶，切割目的基因和质粒载体。

3、用DNA连接酶连接，用氯化钙或者电刺激处理原核生物细胞，把带有目的基因的载体导入原核生物。